Determinación de antígeno Du

Generalidades

El  Du, es un alelo de D, muy importante pero irregular. No existe suero anti-Du específico. Algunas sangres Du deben esta característica al hecho de que el factor D normal heredado, de uno de los padres, está enmascarado por el factor C de un cromosoma aparejado dCe (r´) heredado de otro progenitor: este tipo se conoce como “Du por interacción genética”. El otro tipo “Du hereditario” puede atribuirse a transmisión de un D debilitado.

 Los glóbulos de algunos sujetos Du pueden ser aglutinados directamente por casi todos los sueros anti D, estos casos se denominan ”Du” de título  elevado”. Otras sangres Du son aglutinados solamente por unos cuantos sueros anti D; son los “Du de título bajo”. Lo importante respecto a los  glóbulos Du, especialmente la variedad  “título bajo”, es que probablemente parecerán Rho. Negativos al ser mezclados con anti D. Solamente podrán reconocerse mediante:

• Modificación enzimática previa, o sea, ficnización
• Exposición previa al suero anti D incompleto y luego prueba de Coombs. Los glóbulos Du dan una prueba de Coombs positiva en estas circunstancias. Se recomienda el segundo método.

Otra consideración todavía más importante respecto al Du, es que todos los que poseen el alelo Du deben considerarse como donadores Rho. Negativos. Esto se debe a que el Du puede producir anti D en un sujeto Rho. Positivos, pero receptores Rho. Negativos. Esto se debe a que el Du puede producir anti D en un sujeto Rho. Negativo, y también a que algunos Du producen ellos mismos anti D. Además los sujetos Du por “acción intergenética” no deben recibir sangre  que contenga el antígeno c, muy potente, en otras palabras, debe recibir sangre del genotipo Dce/dCe o DuCe/dCe esta última generalmente corresponde  a su propio genotipo. 

Método en tubo

Fundamento

Ciertos eritrocitos Rho.+, alrededor del 1% con mayor frecuencia en la raza negra que en la caucásica, no son aglutinados por el suero anti Rho. (anti D) pero después de ser expuesto a los anticuerpos Rho. (D), darán una reacción positiva si se tata con suero de Coombs.

Generalidades:

Los hematies del grupo D presentan diferencias en cuanto a su reactividad; se acepta que varios de los factores del sistema Rho. En ocasiones se expresan en forma débil o incompleta los más importantes son: el Du, el Cw y el Eu en realidad solo el Du tiene importancia en el banco de sangre debe sospecharse de ser Du, las sangres que son difíciles de clasificar como Rh positivos o negativos, utilizando solo el suero anti-D

El paciente Du positivo debe recibir sangre Du negativa ya que se han reportado casos que por recibir sangre Rho. positiva desarrollan anticuerpos Anti Rho. de especificidad Anti-D, el factor Du de Stratton, como es débil no es fácil determinarlo, pero conserva su capacidad antigénica. Para investigar este grupo, la técnica de aglutinación con el suero Anti-D ha dado resultados débiles, sin embargo ha servido para que los Anticuerpos se fijen y la prueba de Coombs indirecta nos dará el resultado positivo; observando macroscópicamente el fenómeno de aglutinación: el Antígeno Du se determina por la aglutinación de los glóbulos rojos en presencia del suero Anti-D y  Antiglobulina  Humana 

Material y equipo

• 1 gradilla
• 4 tubos 10 x 75
• 2 pipetas pasteur con bulbo
• 1 Centrifuga Sarofuge
• 1 baño maria a 370c
• Suero Anti-D
• Suero de Coombs
• Albúmina bovina al 22%
• Solución salina en pizeta

 Procedimiento

1.  Preparar glóbulos Rho. negativos al 5%
2. Marcar dos tubos No 1 problema y No 2 control, agregar en cada tubo dos gotas de la suspensión de glóbulos rojos.
3. Al tubo No 1 agregar una gota de suero Anti-D y una gota de Albúmina bovina al 22%, al tubo No 2 dos gotas albúmina bovina al 22%
4. Mezclar y dejar reposar durante dos minutos
5. Centrifugar en busca de aglutinación
6. Lavar por tres ocasiones
7. Despues del último lavado, decantar completamente y agregar dos gotas de Antiglobulina humana a cada tubo
8. Incubar durante 15 minutos a 37° C
9. Centrifugar a 3,500 rpm x 1 minuto
10. 10.Leer sobrenadante y despegar el boton del fondo del tubo cuidadosamente en busca de aglutinación
11. .Reportar por escrito

Interpretación de resultados

• En el tubo control no debe encontrarse aglutinación.
• Si el tubo problema se observa con aglutinación se habla de la presencia del factor Du.
• Si hubiese aglutinación en los dos tubos significa que se trata de glóbulos rojos cubiertos o bloqueados, por lo tanto si se trata de  donador la sangre será desechada