Fraccionamiento de Sangre

SEPARACIÓN PRIMARIA POR CENTRIFUGACIÓN

Figura 1. Separación primaria por centrifugación Elaborado por: Joselyn Iza Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230⁴

La fuerza de centrifugación relativa (fuerza g), RCF es la cantidad de aceleración que se aplicara a la muestra. Depende de una relación entre el radio del rotor de la centrifuga y de las revoluciones por minuto (rpm). Para un protocolo sea adecuado debe indicarse que al momento de usar la centrifuga debe hacerlo usando la fuerza g en lugar de las rpm.⁴

Figura 2. Método de conversión de las fuerzas g (RCP) a rpm Elaborado por: Joselyn Iza Disponible: Rojas, A. Conogasi.org; 2018³

Cuando el control de calidad muestra que los recuentos de plaquetas en los concentrados no son satisfactorios, esta estrategia permite identificar y modificar parámetros del proceso para optimizar la calidad de los concentrados plaquetarios. Luego de la centrifugación suave en el estrato superior se reconoce al PRP como sobrenadante de los GRD. Este PRP se transfiere a una bolsa satélite.

Separación Secundaria por centrifugación

La bolsa con el PRP es sometida a una nueva centrifugación, llamada centrifugación secundaria (giro intenso) cuyo patrón básico es emplear una mayor Fuerza g para lograr que las plaquetas queden en la parte más distal.

El plasma sobrenadante pobre en plaquetas (PPP) resultante se transfiere a otro contenedor o bolsa satélite, dejando aproximadamente 40-70 ml de PPP con el concentrado plaquetario.⁴

Preparación automatizada de hemocomponentes

Luego de la centrifugación primaria, se coloca la SE en el prensa-plasma y una placa de presión impulsa la salida de componentes de la bolsa contenedora, dependiendo de la bolsa de extracción de SE. ⁴

Cuando el sensor óptico del equipo detecta una interfase celular, automáticamente se obtura la tubuladura de salida con el empleo de un clamp mecánico y extrínseco. Los pasos automatizados incluyen agrupamiento, lavado, centrifugado, transferencia, filtrado y sellado.⁴

DESCRIPCIÓN DE LOS HEMOCOMPONENTES MÁS RELEVANTES

Sangre Entera (SE)

La extracción de sangre se realiza en un abolsa que contiene solución anticoagulante-conservante. Tienen un hematocrito de alrededor del 33%. La SE por lo general se fracciona en hemocomponentes y rara vez se utiliza como SE para transfusiones. La SE puede reconstruirse mediante la combinación de GRD y PFC para lograr el nivel de hematocrito deseado.⁴

Glóbulos rojos desplasmatizados (GRD)

Se obtiene a partir de la filtración de Sangre Total y posterior centrifugación, extrayendo la mayor parte del plasma y subsiguiente resuspensión del Concentrado de Hematíes Filtrado en una solución aditiva apropiada.

Conservados en CPD- O CPD2D, periodo de caducidad de 21 días y su hematocrito aproximado esta entre el 65% y 80%. Se puede agregar AS para extender su tiempo de caducidad a 42 días. Las soluciones AS-1 y AS-5 contienen manitol, no así la AS-3. El hematocrito en estas unidades varía entre 55% a 65%. ⁴

El contenido de hemoglobina por unidad de GRD es variable ya que los niveles de hemoglobina varían de donante a donante. La cantidad de hemoglobina presente en las unidades de GRD obtenida mediante métodos automatizados es mucho más consistente que en unidades derivadas de extracción de SE.⁴

Plaquetas

Los concentrados plaquetarios de Sangre total se obtienen utilizando dos métodos:

El método PRP el cual consiste en una centrifugación suave seguida de una intensa. La centrifugación es el procedimiento básico para obtener PRP, con un rendimiento aproximado del 10% sobre la sangre extraída. A pesar de coincidir en el fundamento de la técnica, los rendimientos varían en cuanto a viabilidad (30-85%) y concentración de plaquetas²

El segundo método consiste en una centrifugación intensa de la unidad de SE que permite la remoción hacia las bolsas de transferencia del plasma pobre en plaquetas sobrenadante en la parte superior de la bolsa y los GRD en la parte inferior. La capa leucocitaria que permanece en la bolsa primaria se utiliza para recolectar plaquetas. Las plaquetas pueden prepararse utilizando este método de SE almacenada a temperatura ambiente (no menor a 20°C) durante 24 horas.

Las plaquetas deben estar en continuo movimiento durante el almacenamiento a una temperatura entre 20°C y 24°C.

PLASMA FRESCO CONGELADO

Figura 4. Plasma Fresco congelado Elaborado por: Joselyn Iza Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴

Se obtiene en el Banco de Sangre mediante centrifugación de las unidades de Sangre total y retirada del PF que se conserva congelado a -30°C para conservar niveles adecuados de Factor VIII, al menos 0,7 UI/ml, un contenido celular inferior a 40 x 10⁹ plaquetas/L y una tasa de Hemoglobina 0,05 gr/dl. El volumen mínimo es de 200 ml.

Con el método de centrifugación suave, el número de linfocitos viables es de 0.04 a 3.6 x 10⁶. El método de centrifugación intensa da como resultado un número de linfocitos viables de 0.47 a 45.4 x 10⁶.⁴

Almacenamiento

El PFC se separa de la SE y se almacena en el congelador dentro de las 8 horas de haberse extraído la sangre o según las instrucciones del fabricante para la utilización del sistema de extracción de sangre, procesamiento y almacenamiento.⁴

Caducidad de 12 meses a -18°C
Según el MBBI caducidad de 7 años a -65°C (requiere aprobación de la FDA)
Según el consejo europeo caducidad de 36 meses a -25°C y 3 meses de -18°C a -25°C

Preparación de PFC

Los métodos de la preparación de PFC que se encuentran detallados en los estándares del Consejo de Europa incluyen lo siguiente:

Plasma que se separa dentro de las 6-18 horas luego de obtenerse la unidad si está refrigerada
Plasma que se separa de las unidades de SE conservadas a una temperatura de entre 20 °C-24 °C hasta 24 horas. Se puede lograr un rápido congelamiento de plasma utilizando un ultra congelador, hielo seco, o una mezcla de hielo seco y etanol o anticongelante.⁴

Métodos para saber si se descongela el plasma:

Liga o tubo que deje hendidura al momento de congelar, de esta manera se sabrá que se está descongelando el producto a manera que la hendidura desaparece.
Colocar la bolsa de manera horizontal o vertical, para saber ubicación de burbujas al momento de descongelarse.⁴

Volumen de plasma

El volumen de plasma por unidad varía de acuerdo a1 método utilizado para obtener plasma. En los últimos años, muchos bancos de sangre de Estados Unidos han incrementado la cantidad de SE de 450 a 500 mL, lo cual tiene como resultado una mayor cantidad de plasma por unidad. Una unidad puede contener de 500 a 800 mL de plasma cuando la extracción se realiza mediante plasmaféresis automatizada (de un solo donante).⁴

Contenido del PFC

El PFC contiene cantidades normales de factores de coagulación, antitrombina y ADAMTS13. El número de glóbulos blancos presente en el PFC varía de acuerdo con el método de centrifugación que se utilice. Existe registro de linfocitos viables en PFC descongelado.

Con el método de centrifugación suave, el número de linfocitos viables es de 0.04 a 3.6 x 106. El método de centrifugación intensa da como resultado un número de linfocitos viables de 0.47 a 45.4 x 1
Con el método de segunda centrifugación, el número es de 0.4 a 37.2x 10'leucocitos.
Aún más, en el caso de los métodos de centrifugación intenso y segunda centrifugación, 92% a 86% de las bolsas tenían recuentos de <5 x 106, respectivamente.⁴

Caducidad

Una vez que se descongela el PFC, tiene un tiempo de caducidad de 6 horas si se lo conserva a 1 °C-6 oc. La extensión de dicho tiempo de 6 horas a 24 horas luego del descongelamiento significó una variación de la 21 CFR 606,122 (m)(3) de la FDA. Sin embargo, al final del intervalo, el plasma puede rotularse como plasma descongelado, puede almacenarse por un período de 4 días adicionales a 1 C-6°C.⁴

PLASMA SOBRENADANTE DE CRIO (PSC)

Figura 5. Plasma Sobrenadante CRIO (PSC) Elaborado por Vinicio Guadalupe Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴

PLASMA LIQUIDO (PL)

El PL para transfusiones puede separarse de la SE en cualquier momento durante el almacenamiento y conservarse a una temperatura de 1 °C-6°C hasta 5 días luego del tiempo de caducidad de la SE.⁴

PLASMA RECUPERADO

Figura 6. Plasma Líquido (PL) Elaborado por Vinicio Guadalupe Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴

PLASMA INACTIVADO (PI)

El plasma puede tratarse para inactivación de agentes microbianos a fin de lograr reducción del microbiota patógeno. Existen tres métodos que se utilizan en Europa, pero no en Estados Unidos: el azul de metileno, psoraleno (amotosalen), y tratamiento con solventes/detergentes.

Figura 7. Plasma Inactivado Elaborado por Vinicio Guadalupe Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴

^{Figura 8. Plasma Inactivado Elaborado por Vinicio Guadalupe Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴}

CRIOPRECIPITADO (CRIO)

El CRIO se obtiene del PFC. Esta proteína insoluble en frío, que precipita cuando el PFC se descongela a 1°C – 6°C, y se obtiene por centrifugación. El plasma sobrenadante (plasma sobrenadante de CRIO) se transfiere a una bolsa satélite; y el precipitado se resuspender en una pequeña cantidad de plasma residual, generalmente 15 mL, y luego se congela nuevamente.⁴

El descongelamiento del PFC para preparar CRIO puede llevarse a cabo colocando el PFC en un refrigerador (1°C - 6°C) durante la noche o en un baño de agua circulante de 1°C - 6° C.⁴

También se ha descripto un método alternativo que utiliza microondas para descongelar. El CRIO se congela dentro de la hora de preparación para ser almacenado a -18°C durante 12 meses a partir de la fecha original de extracción.⁴

Los Estándares de la MBB requieren que el CRIO contenga por 10 menos 80 unidades internacionales (UI) de Factor VIII y 150 mg de fibrinógeno por unidad, aunque generalmente el promedio de contenido de fibrinógeno es de 250 mg.⁴

Además, contiene la actividad del Cofactor de Ristocetina-vWF (aproximadamente 170 unidades/bolsa), Factor XIII (aproximadamente 60 unidades/bolsa), y fibronectina. A aquellas unidades que contienen 15 mL de plasma o más a menudo se las denomina "CRIO húmedo" mientras que el término "CRIO seco" por lo general tiene menos de 10 mL de plasma por unidad.⁴

Figura 9. CRIO Elaborado por Vinicio Guadalupe Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴

El CRIO de los grupos sanguíneos A y B tiene niveles más altos de Factor VIII cuando se los compara con aquellos derivados de los donantes con grupo sanguíneo O (apro ximadamente 120 vs 80 UI por bolsa, respectivamente).⁴

Los CRIO pueden prepararse para transfusiones de tres maneras:

Una unidad simple puede almacenarse durante 6 horas luego del descongelamiento.
Los "pools" - utilizando un sistema "abierto" (sin usar un CET) pueden almacenarse durante 4 horas luego del descongelamiento
Los pools utilizando un sistema" cerrado" (empleando un CET) tanto antes del almacenamiento congelado, como después del descongelamiento, pueden conservarse por 6 horas luego del descongelamiento o preparación de un "pool".

GRANULOCITOS

Los granulocitos pueden prepararse de extracciones de SE. Las unidades de SE que tienen menos de 24 horas se las deja descansar por 1 hora luego de agregarles 60 mL de hidroxietilalmidón (HEA) a la unidad.⁴

La fuerza de gravedad ubica los glóbulos rojos en la parte inferior y el plasma se conserva en la parte superior.
La capa de buffy coat, que contiene a los granulocitos, se ubica en la interfase entre el plasma y los glóbulos rojos.
El plasma y el buffy coat se transfieren a una bolsa satélite luego de la sedimentación.
Luego el plasma se centrifuga a 5000 x g durante 5 minutos a 22 oc.
Una vez separado del buffy coat por la centrifugación, se transfiere nuevamente a la unidad de GRD.⁴

Aproximadamente 20 mL del plasma sobrenadante se deja con los granulocitos. Dicho método arroja 1,25 x 10' granulocitos por producto y tiene un promedio de hematocrito del 4%. Los granulocitos se almacenan a una temperatura de 20°C a 24°C dejándolos reposar sin agitación y caducan a las 24 horas de la extracción.⁴

PREPARACIÓN DE COMPONENTES ESPECIALES

LEUCORREDUCCIÓN (LR) POR FILTRACIÓN PREVIA AL ALMACENAMIENTO

Existe una gran diferencia entre los estándares de Estados Unidos y los estándares del Consejo Europeo en cuanto al número de leucocitos residuales en los hemocomponentes LR en la etapa previa al almacenamiento.

Figura 10. Leucorreducción Elaborado por María del Cisne Angamarca Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴

En el caso de plaquetas derivadas de sangre entera, los Estándares de la MBB exigen que el proceso de LR asegure que el 95% de las unidades de plaquetas contengan menos de 8.3 x 10⁵ leucocitos por unidad y que por lo menos el 75% de los concentrados contengan 5.5 x 10¹⁰ plaquetas y que como mínimo el 90% de las unidades tengan un pH 6.2 al finalizar el período de almacenamiento permitido.⁴

El número, según los estándares del Consejo de Europa es <0.2 x 10⁶ leucocitos residuales por unidad de plaquetas obtenidas de SE.
La filtración para· LR fracasa el 50% de las unidades de glóbulos rojos con el rasgo drepanocítico. Aunque el otro 50% puede concluir la filtración, el contenido residual de leucocitos suele ser mayor que los límites fijados.
Los estándares del Consejo de Europa exigen que el número máximo de leucocitos y plaquetas por unidad sea <0.1 x 10/L y <50.0 x 10/L, respectivamente.

Figura 11. Filtro para leucorreducción Disponible en: https://es.slideshare.net/lucasmerel/leucorreduccion-e-irradiacion-de-hemocomponentes-presentation

La LR pre-almacenamiento se lleva a cabo generalmente inmediatamente luego de la extracción de SE y siempre dentro de los 5 días de haber sido extraída. Los filtros de LR de SE ubicados "en línea" se encuentran disponibles en equipos de extracción que permiten la preparación de GRD y PFC leucorreducidos.⁴

Figura 12. Sistema de filtro de eliminación de leucocitos hecho de material de poliuretano biocompatible. Disponible en: https://www.sistemasanaliticos.com/productos/filtros-para-leucorreduccion/

Los métodos que miden los leucocitos residuales incluyen la citometría en cámara de Nageotte, citometría de flujo y microfluorimetría.

Siempre que se evaluaron muestras preparadas en fresco (dentro de las 24 hs), los estudios multicéntricos demostraron que la citometría de flujo y la microfluorimetría fueron técnicas superiores respecto de la citometría en cámara de Nageotte.

Por ejemplo, a una concentración de 5 leucocitos por µL de unidades de GRO, el coeficiente de variación (CV) fue del 4,9% para citometría de flujo, 15,2% para microfluorimetría y 54% para hemocitometría Nageotte. En general, la hemocitometría de Nageotte tiende a sobrestimar el número de glóbulos blancos al compararse con la citometría de flujo y la microfluorimetría.⁴

CRIOPRESERVACIÓN DE GLÓBULOS ROJOS

Los GRD pueden congelarse con un agente crioprotector y pueden ser almacenados durante períodos de tiempo prolongados. El glicerol es el agente más utilizado y se agrega a los GRD dentro de los 6 días de la extracción.

Figura 13. Leucorreducción Elaborado por María del Cisne Angamarca Disponible: Manual técnico AABB. 17th ed;2012. p: 225-230 ⁴

En la mayoría de los casos, la adición del glicerol y su remoción (desglicerolización) requieren que el sistema se encuentre abierto; por esta razón, las unidades descongeladas y desglicerolizadas pueden almacenarse sólo por 24 horas a 1ºC - 6ºC.

La solución final en la cual se suspenden los glóbulos es de cloruro de sodio al 0.9% y dextrosa al 0.2%. La dextrosa proporciona nutrientes y ha demostrado proporcionar satisfactoria viabilidad durante 4 días de almacenamiento luego de la desglicerolización hasta la transfusión.

También se encuentra disponible la adición y remoción automatizada de glicerol a GRD en un circuito cerrado. Con este sistema, se agrega glicerol dentro de los 6 días de la extracción de SE. Los glóbulos rojos luego del descongelamiento preparados de esta manera se resuspenden en AS-3 y pueden almacenarse por 14 días a 4ºC. ⁴

Comparación de dos métodos para criopreservación de glóbulos rojos

Consideración	Alta concentración de glicerol	Baja concentración de glicerol
Concentración final de glicerol (peso/volumen)	Aproximadamente 40%	Aproximadamente 20%
Temperatura de congelamiento inicial	-80°C	-196°C
Velocidad de congelamiento	Lento	Rápido
Necesidad de congelamiento controlado	No	Si
Tipo de congelador	Mecánico	Nitrógeno líquido
Temperatura de almacenamiento(máximo)	-65°C	-120°C
Cambio en la temperatura de almacenamiento	Puede ser descongelado o re congelado	Crítico
Tipo de bolsas de almacenamiento	Policloruro de vinilo; poliolefina	Poliolefina
Traslado	Hielo seco	Nitrógeno líquido
Equipo de desglicerolización	Sí	No
Hematocritos	55% - 70%	50 – 70%

Tabla N 1. Comparación de dos métodos para criopreservación de glóbulos rojos Disponible: Anronson C., AuBuchon J, Blietz J, et al. Manual técnico: de la American Asocciation of Blood Banks, 17ª ed. - Buenos Aires: Asociación Argentina de Hemoterapia e Inmunohematología, 2012.⁴

Las unidades luego del descongelamiento tienen un hematocrito de 51 %-53 % y contienen aproximadamente 9.0 x 10⁶ leucocitos por unidad. Los GRD almacenados durante 42 días en AS-1, AS-3 o AS-5 y luego rejuvenecidos, congelados y lavados en un sistema cerrado pueden, en consecuencia, almacenarse por 24 horas a 1ºC - 6ºC basado en una sobrevida satisfactoria luego de transfusión autóloga.⁴

CRIOPRESERVACIÓN DE PLAQUETAS

El procedimiento de criopreservación se utiliza sólo ocasionalmente para transfusiones autólogas en escasos pacientes seleccionados. No obstante, el más utilizado es el dimetilsulfóxido al 5% o 6% (DMSO, por sus siglas en inglés), principalmente en el caso de transfusiones de plaquetas autólogas en pacientes resistentes a plaquetas alogeneicas.

Generalmente, las plaquetas se obtienen por aféresis, se almacenan a temperatura ambiente durante 24 horas, y se congelan. Se agrega suficiente DMSO para lograr una concentración final de 5% o 6%.⁴

Figura 14. Plaquetas criopreservadas como alternativa en situaciones especiales Disponible en: https://www.postersessiononline.es/312191188_es/congresos/59SEHH/aula/-PC_50_59SEHH.pdf

Las plaquetas con crioprotectores se ubican en un congelador mecánico a -80 ºC, pueden almacenarse por lo menos durante 2 años. Luego del descongelamiento, la recuperación in vitro de las plaquetas es del 75%, lo que puede reducirse aún más si las plaquetas descongeladas se centrifugan para remover el DMSO antes de la transfusión. In-vivo, las plaquetas presentan luego de la transfusión una función hemostática efectiva. ⁴

Cuando se necesitan plaquetas para transfusiones, se descongelan a 37 °C.
Las plaquetas descongeladas se centrifugan para remover el crioprotector.
Se resuspenden en 50-100 mL del plasma autólogo y se utilizan para transfusión dentro de las 2-3 horas luego de la remoción del congelador.
Luego de la transfusión autóloga, el incremento medio de recuento corregido en 1 hora y 24 horas es de 15.700 y 13.000, respectivamente.

IRRADIACIÓN

Los componentes celulares pueden irradiarse para evitar la enfermedad de injerto versus huésped postransfusional (EICH). Los componentes de plasma congelado como el PFC y el CRIO no necesitan irradiación ya que son considerados componentes no celulares ya que el escaso número de leucocitos presentes en los componentes podría no sobrevivir al ciclo congelamiento-descongelamiento.⁴

Las fuentes de irradiación en uso incluyen rayos gamma tanto de Cesio 137 como de Cobalto 60 y rayos X producidos por aceleradores lineales de terapia radiante o por unidades independientes. Ambas fuentes permiten lograr resultados satisfactorios al dejar inactivos a los linfocitos T.

La dosis de radiación en el centro del campo de irradiación debe ser de por lo menos 25 Gy (2500 cGy) y no más de 50 Gy (5000 cGy). Durante la dosimetría la dosis de 2500 cGy se dirige al plano medio interno del contenedor. Aún más, la dosis mínima suministrada a cualquier parte de los hemocomponentes debe ser de por lo menos 1500 cGt en un depósito completamente lleno.⁴

Figura 15. Servicio de irradiación de componentes sanguíneos Fuente: https://www.youtube.com/watch?v=BZJbPWlplu0

Se necesitan varios pasos de aseguramiento de la calidad para certificar una irradiación adecuada de los hemocomponentes. Dichas mediciones se llevan a cabo para demostrar que los equipos en uso funcionan correctamente y que la irradiación de los componentes ocurrió de verdad. Cada equipo debe ser controlado rutinariamente a fin de asegurar que se suministre la dosis adecuada hacia el contenedor que alberga los hemocomponentes durante la irradiación.

En el caso de los GRD, las unidades irradiadas pueden almacenarse por 28 días o hasta la fecha de caducidad original, lo que suceda primero.
Las plaquetas pueden irradiarse hasta su fecha de caducidad y la fecha posterior a la irradiación es la misma que la fecha original.

La irradiación de los GRD seguida de almacenamiento tiene como resultado alguna disminución en el porcentaje de recuperación luego de la transfusión (± 10%). Además, la mayor liberación de potasio de los glóbulos rojos lleva a que los niveles de potasio aumenten aproximadamente al doble en comparación con las unidades no irradiadas. ⁴

PREPARACIÓN DE POOLES

Las plaquetas que se agrupan en pooles tienen un tiempo de caducidad de 4 horas desde el momento en que se abre el circuito para preparar el pool. El sistema aprobado por la FDA permite el almacenamiento de plaquetas en pooles hasta 5 días desde el momento de la extracción de SE. Pueden preparar pooles de 4 a 6 unidades de plaquetas LR o no LR que sean ABO idénticas utilizando un conector estéril de tubuladura.⁴

La fecha de caducidad más corta de las unidades que componen el pool determina la fecha de su caducidad. En Estados Unidos, cada pool de plaquetas LR debe tener <5x10^6 leucocitos residuales. El equipo aprobado también permite la toma de muestra de un pool a fin de detectar contaminación bacteriana El pool debe ser rotulado con el volumen total aproximado, el ABO/Rh de las unidades y el número de unidades que lo componen.⁴

Los pooles de CRIO preparados inmediatamente antes de la transfusión en un sistema" abierto" tienen un tiempo de caducidad de 4 horas en un almacenamiento de 20 °C-24°C. Los pooles prealmacenamiento también pueden prepararse en un sistema 11 abierto" o 11 cerrado" y almacenarse durante 12 meses a una temperatura de -18 °C.⁴

Los "pooles" de un sistema abierto ya descongelados tienen un tiempo de caducidad de 4 horas en un almacenamiento de 20 °C-24 °C. El pooling prealmacenamiento los CRIOs deben colocarse en un congelador durante 1 hora. La potencia del pool se calcula asumiendo que cada unidad contiene 80 VI de Factor VIII de coagulación y 150 mg de fibrinógeno multiplicados por el número de unidades en dicha agrupación. ⁴

PLAQUETAS CON VOLUMEN REDUCIDO

La cantidad de plasma se reduce por centrifugación para concentrar aún más las plaquetas en cada unidad. El plasma sobrenadante se remueve y, en consecuencia, las plaquetas sedimentadas se suspenden en un volumen menor de plasma comparado con el volumen inicial. Las plaquetas con volumen reducido pueden almacenarse tanto en jeringas de plástico con una capacidad de 10 mL o 15 mL hasta 6 horas. Bajo dichas condiciones de almacenamiento, el pH del concentrado de plaquetas aparenta estar conservado en valores por encima de 6.

Las plaquetas con volumen reducido pueden ser necesarias para aquellos pacientes en los que la cantidad de plasma en las unidades de plaquetas puede causar falla cardíaca o para aquellos pacientes que reciben transfusiones con plaquetas ABO incompatibles. Las plaquetas con volumen reducido también se utilizan para neonatos y para transfusiones intrauterinas. ⁴

SOLUCIONES REJUVENECEDORAS

Los diferentes métodos de conservación mimetizan condiciones similares a las fisiológicas y así provee un componente viable y funcional para aquellos que lo requieran. El almacenamiento de GRD (Glóbulos rojos desplasmatizados) causa reducción en los niveles intracelulares de 2,3-difosfoglicerato (2,3DPG) y trifosfato de adenosina (ATP). Dichos niveles pueden restaurarse a los niveles normales si se agrega, en cada 50 mL de la solución rejuvenecedora contiene 550 mg de piruvato de sodio, 1,34g de inosina, 0,034g de adenina, 0,50g de fosfato de sodio dibásico (anhidro), y 0,20g de fosfato monobásico de sodio (monohidrato) en agua para "inyección", con un pH de 6,7 - 7,4. ⁴

La solución rejuvenecedora proporciona la siguiente información:

GRD conservados en CPD o CPDA-l pueden rejuvenecerse hasta 3 días luego de la fecha de caducidad de los GRD siempre y cuando las condiciones de almacenamiento sean las correctas
GRD conservados en AS-l pueden rejuvenecerse hasta 42 días, pero no luego de la fecha de caducidad
los GRD con CPD O CPDA-l rejuvenecidos pueden mantenerse en almacenamiento congelado durante 10 años
los GRD con AS-1 pueden almacenarse congelados sólo por 3 años. ⁴

La solución rejuvenecedora para GRD conservados en CP2D, AS-3 y AS-5 no está aprobada por la FDA. No obstante, se ha demostrado una sobrevida satisfactoria luego del rejuvenecimiento de GRD conservados en CP2D AS-3, CPD AS-3 Y CPD.⁴

Los GRD rejuvenecidos deben ser lavados para remover la solución rejuvenecedora. Otra opción es congelar la unidad rejuvenecida con glicerol para permitir un almacenamiento a largo plazo. En el momento de la transfusión, se lleva a cabo la desglicerolización, que logra la remoción de la solución rejuvenecedora y del glicerol. Los GRD desglicerolizados y rejuvenecidos tienen un período de caducidad de 24 horas. ⁴

CUARENTENA

Los hemocomponentes, son llevados a cuarentena, hasta la realización y validación de las pruebas de los marcadores infecciosos, para posteriormente ser aptos para transfundir a los receptores de acuerdo a sus necesidades. Ésta cuarentena se la realiza por un tiempo mínimo de 72 horas ya que esto ha evidenciado disminuir la posibilidad de transmisión de enfermedades como la sífilis debido a la pérdida de capacidad infectante del Treponema pallidum luego de este tiempo.⁴

ROTULADO

La reglamentación requiere que, como mínimo, el rótulo contenga información en código de barra sobre los siguientes ítems:

Nombre del componente e Identificación: El rótulo debe incluir el nombre propio del componente, incluyendo cualquier calificador, en caso de que corresponda. Además, cada componente debe tener un número ID único que pueda rastrearse hasta llegar al donante de sangre.
Fabricante: El nombre y el número de registro de la FDA del productor debe incluirse en el rótulo.
Fecha de caducidad: La fecha de caducidad debe incluir claramente el día, el mes y el año de caducidad.
Tipo de donante: En el caso de los componentes para transfusiones, el rótulo debe indicar tanto si el donante es ‘’pago" o voluntario"
Cantidad de hemocomponentes y de soluciones anticoagulantes y conservadoras: Debe describirse el volumen del componente en la unidad de almacenamiento (±) 10%.
Resultados de las evaluaciones: Se requiere el grupo ABO y Rh en el rótulo. En el caso de CRIOS, puede omitirse el Rh.
Aclaraciones: Las siguientes aclaraciones deben estar presentes, si corresponden: para componentes sólo para transfusión "Sólo R", conservar para próximo proceso de producción, sólo para uso de emergencia, sólo para uso autólogo, no apropiado para transfusión, irradiado, biocontaminante, proveniente de flebotomía terapéutica, probado para factores especiales, por ejemplo, tipo de HLA. ⁴

CONTROL DE CALIDAD DE LOS HEMOCOMPONENTES

COMPONENTE SANGUÍNEO

PARÁMETROS

VALORES DE REFERENCIA

FRECUENCIA Y CANTIDAD

Sangre Total

Volumen de sangre total recolectado

450 ml +/- 10%

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Glóbulos Rojos Estándar

Volumen

280 +/- 50 ml

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Hematocrito

65-80 %

Cultivo microbiológico

Negativo

Glóbulos rojos sin capa leuco plaquetaria (BuffyCoat) o pobres en leucocitos en solución aditiva

Volumen

230-330ml*

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Hematocrito

50-70 % **

Recuento de leucocitos

<1.2 x10^9/ Unidad

Cultivo microbiológico

Negativo

Glóbulos rojos leucorreducidos con o sin solución aditiva

Volumen

230-330 ml*

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Hematocrito Recuento de

50-70 %

leucocitos Cultivo

<1.0 x10^6/ Unidad

microbiológico

Negativo

Glóbulos rojos leucorreducidos en solución aditiva obtenido de la filtración de sangre total

Volumen

350 +/- 50 ml

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Hematocrito

50-70 %

Recuento de leucocitos

<1.0 x10^6/ Unidad

Cultivo microbiológico

Negativo

Glóbulos rojos irradiados

Volumen

230 +/- 50ml*

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Hematocrito

50-70 %

Recuento de leucocitos

Cultivo microbiológico

<1.0 x10^6/ Unidad

Negativo

Plasma Fresco congelado

Volumen

Inspección visual

150-300mL

Ausencia de coágulos, lipemia,

Ictericia o Hemólisis

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Células residuales

Leucocitos

<0.1 x10^9/L

Plaquetas

<50 x10^9/L

Glóbulos rojos

<6 x10^9/L

Crioprecipitado

Volumen

15-30 mL

Cada que se prepare nuevo lote. Cumplimiento de los parámetros en el 75%de las unidades evaluadas.

Concentración de factor VIII

>80Ul/Unidad

Concentración de fibrinógeno

>150 mg /Unidad

Concentrado de Plaquetas unitario

Volumen

50-70mL

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Recuento de plaquetas

</= 5.5 x10^10/Unidad

6.2-7.4

Recuento de leucocitos (plaquetas obtenidas a partir de plasma rico en plaquetas)

<0.2 x10^9/Unidad

Recuento de leucocitos (plaquetas obtenidas a partir de capa leucoplaquetaria Buffy Coat)

<0.5 x10^8/Unidad

Cultivo microbiológico

Negativo

Concentrado de plaquetas unitario leucorreducidos

Volumen

50-70 mL

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Recuento de plaquetas

</= 5.5 x10^10/Unidad

6.2-7.4

Recuento de leucocitos post-filtración

<1.6 x10^5/Unidad

Cultivo microbiológico

Negativo

Concentrado de plaquetas obtenido por aféresis

Recuento de plaquetas

</= 3.0x10^11/Unidad

Mensual 1% o 4 unidades al mes (El valor mayor)

Recuento de leucocitos con leucorreducción

<1.0x10^6/Unidad

6.2-7.4

Cultivo microbiológico

Negativo

Bibliografía:

Flores, J. Palomar, M y García, J. Plasma rico en plaquetas: fundamentos biológicos y aplicaciones en cirugía maxilofacial y estética facial. Rev Esp Cirug Oral y Maxilofac [Internet] 2012 [consultado 03 mar 2021]; 34 (1). Disponible en: http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1130-05582012000100002
Ados. Fraccionamiento y distribución de componentes sanguíneos [Internet]. Segas.es; 2017 [consultado 03 mar 2021]. Disponible en: https://ctg.sergas.es/Paxinas/web.aspx?tipo=paxtxt&idLista=6&idContido=10&migtab=1%3B10&idTax=9400&idioma=es
Rojas, A. Método: Conversión de las fuerzas g (RCF) a revoluciones por minuto (rpm) y Equilibrio del rotor [Internet] Conogasi.org; 2018 [revisado 20 mar 2020; consultado 03 mar 2021]. Disponible en: http://conogasi.org/articulos/metodo-conversion-de-las-fuerzas-g-rcf-a-revoluciones-por-minuto-rpm-y-equilibrio-del-rotor/
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