Tipificación del subgrupo de “A” uso de Lectina A1

Generalidades

Los eritrocitos que poseen antígeno A pueden ser subdivididos en Al y A2, las células rojas del grupo A que aglutinen con Anti Al lectina, se consideran del subgrupo, aquellas que no aglutinan con Anti A1 lectina, se clasifican como A2. Aproximadamente el 80 % de las células, son Al y el restante 20% se consideran A2.

Método en tubo.

Fundamento

Los procedimientos usados con este reactivo, están basados en el principio de aglutinación, las células humanas normales, conteniendo antígenos se aglutinan en presencia del anticuerpo del antígeno correspondiente algunos extractos de semillas lectina contienen aglutininas con especificidad de grupos sanguíneos humanos, el extracto de la semilla dolichus biflorus es virtualmente específica para el antígeno. Al en células rojas humanas contiene un fito hemo aglutinina, la cual como se dijo anteriormente aglutina las células rojas de los subgrupos Al o A1B.

Material y equipo:

• 1 gradilla
• 4 tubos ensayo 10 x 75
• 2 pipetas Pasteur con bulbo
• 1 centrifuga clínica o Serofuge
• Suero Anti-Al lectina
• Solución salina en pizeta.

 Procedimiento

1. Preparar una suspensión de glóbulos rojos en solución salina al 5%
2. Colocar una gota de Anti A Lectina en un tubo de 10x 75
3. Con una pipeta Pasteur, agregar una gota de la suspensión de glóbulos rojos.
4. Mezclar bien y centrifugar a 2500 rpm por un minuto.
5. Resuspender los glóbulos rojos cuidadosamente y examinar el tubo en busca de aglutinación.

Interpretación.

1. Cuando los glóbulos rojos son aglutinados la reacción es positiva e indica la presencia de antígeno A1 y por lo tanto los glóbulos rojos son A1
2. Cuando los glóbulos rojos no aglutinan, la reacción es negativa e indica la ausencia de antígeno A1 y los glóbulos rojos son A2
3. Cuando se investiga en una sangre AB, con Antia Al lectina, si aglutina es AlB, si no aglutina es A2B 

No se requiere preparación especial del paciente previo a la recolección de los especímenes, puede usarse sangre recolectada con o sin Anticoagulantes. Las  muestras de sangre deben ser analizadas lo antes posible después de la obtención. Si el análisis tiene que ser retrasado, las muestras deben conservarse bajo refrigeración entre 2 y 8° C.

Los glóbulos rojos recolectados y conservados en citrato de sodio, oxalato de amonio; con oxalato de potasio han de mostrado que mantienen su reactividad por 28 días. Los glóbulos rojos recolectados y conservados con sangre coagulada o en citrato de sodio u oxalato de sodio, han demostrado su reactividad por lo menos durante 14 días; si los hematíes se recolectan sobre EDTA o heparina, éstas deben ser analizadas dentro de las 48 horas. 

Limitaciones del procedimiento

• Todas las pruebas usando antisuero hemoagrupadores ABO, deben ser llevadas a cabo a temperatura ambiente y nunca incubarse a temperaturas más elevadas,
• El antígeno al no es totalmente expresado en células rojas de recién nacidos y  pueden obtenerse falsos negativos
• Glóbulos rojos de más de 28 días pueden ser probados con este reactivo aun cuando las reacciones positivas pueden ser más débiles que las obtenidas de glóbulos rojos frescos,
• Contaminación de los especímenes de sangro o de los materiales suplementarios usados, pueden interferir con los resultados de la prueba.